تولید موش ترانس‌ژنیک واجد ترانس‌ژن بتالاکتوگلبولین- کلسیتونین
نویسندگان
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: بیان پروتئین‌های خارجی در شیر پستانداران یکی از راه‌کارهایی است که به تدریج کاربرد وسیعی در تولید انبوه فرآورده‌های دارویی نوترکیب می‌یابد، به‌ویژه فرآورده‌هایی که دست‌خوش بیش‌ترین تغییرات پس از ترجمه‌ای می‌شوند. هدف از این تحقیق ایجاد موش‌های ترانس‌ژنیکی بود که واجد ترانس‌ژن بیان‌کننده کلسیتونین هیبرید در غدد شیری موش باشند. مواد و روش‌ها: در این تحقیق از یک پروموتر اختصاصی شیر به نام بتالاکتوگلبولین گوسفندی (oBLG) برای القای بیان کلسیتونین هیبرید نوترکیب در شیر موش استفاده شد. بر این اساس، یک سازه ژنی متشکل از 7/10 کیلوباز از ژن oBLG شامل پروموتر و ناحیه پایین دست ژن ساخته شد و توالی کدکننده کلسیتونین در چارچوب ترجمه اگزون پنجم oBLG قرار داده شد. سازه ژنی کلون شده پس از تخلیص روی شیب سزیم کلراید، از ناقل خود آزاد شد و به وسیله ژل آگارز تخلیص گردید و با فیلتراسیون و رقیق سازی آماده استفاده شد. آن‌گاه سازه ژنی مزبور به کمک میکرومانیپولاتور در تخمک‌های تازه بارور موش تزریق شد و سلول‌های زنده مانده از این تزریقات، به لوله رحمی موش‌هایی با آبستنی کاذب بازگردانده شدند. حاصل این انتقال زیگوت‌های تزریق شده 41 موش بود که ژنوتیپ آن‌ها با استفاده از PCR، اسلات بلات و ساترن بلات تعیین گردید. یافته‌ها: نتایج تعیین ژنوتیپ با PCR نشان داد که 9 موش از نظر وجود ترانس‌ژن مثبت هستند، در حالی که تنها 4 موش بلات مثبت داشتند. 3 موش نر و 3 موش ماده، ترانس‌ژن را به نسل بعدی، یعنی نسل اول موش‌های ترانس‌ژنیک انتقال دادند. موش‌های نسل اول به بعد نیز ترانس‌ژن را به صورت پایا و تابع قواعد مندلی به نسل دوم انتقال دادند. نتیجه‌گیری: با توجه به این که 6 موش از 9 موش مزبور توانستند ترانس‌ژن را حداقل به یکی از موش‌های نسل بعدی خویش انتقال دهند، این 6 موش را می‌توان بانی‌های (Founders) مستقل ترانس‌ژنیک و سردسته خانواده‌های ترانس‌ژنیک مزبور در نظر گرفت.
منابع مشابه
تولید موش ترانس ژنیک واجد ترانس ژن بتالاکتوگلبولین- کلسی تونین
سابقه و هدف: بیان پروتئین های خارجی در شیر پستانداران یکی از راه کارهایی است که به تدریج کاربرد وسیعی در تولید انبوه فرآورده های دارویی نوترکیب می یابد، به ویژه فرآورده هایی که دست خوش بیش ترین تغییرات پس از ترجمه ای می شوند. هدف از این تحقیق ایجاد موش های ترانس ژنیکی بود که واجد ترانس ژن بیان کننده کلسی تونین هیبرید در غدد شیری موش باشند. مواد و روش ها: در این تحقیق از یک پروموتر اختصاصی شیر ب...
متن کاملافزایش تولید آنتی‌بیوتیک کلاولانیک اسید با ایجاد گونه‌های استرپتومایسس کلاولی‌جروس تراریخت واجد ژن claR
مقدمه : کلاولانیکاسید از جمله آنتی‌بیوتیک‌های مهار کننده‌ی β لاکتاماز بوده که توسط استرپتومایسس کلاولی‌جروس تولید میشود. کلاولانیکاسید در ترکیب با سایر آنتی‌بیوتیک‌های قوی و حساس به β لاکتاماز مورد استفاده بالینی قرار میگیرد. ژن CalR از جمله ژن‌هایی بوده که نقش مهمی در تنظیم تولید کلاولانیکاسید ایفا نموده و به منظور بیان ژن‌های اواخر مسیر بیوسنتز کلاولانیکاسید مورد نیاز است. مواد ...
متن کاملتولید گونه‌ی تراریخت استرپتومایسس کلاولی‌جروس واجد ژن cas2 و بررسی افزایش تولید پادزیست در آن با روش بیواسی
زمینه و اهداف: استرپتومایسس کلاولی‌جروس تولیدکننده‌ی پادزیست کلاولانیک اسید است که به‌طور گسترده‌ای همراه با سایر پادزیست‌های قوی و حساس به β لاکتاماز استفاده می‌گردد. ژن cas2 در دسته ژنی کلاولانیک اسید قرارگرفته و در تنظیم بیوسنتز کلاولانیک اسید نقش دارد. مواد و روش کار: سازه (کانسترکت) نوترکیب pMTcas2 حاوی ژن cas2 از دانشگاه اصفهان تهیه گردید. با استفاده از روش لیز قلیایی پلاسمید نوترکیب ا...
متن کاملارتباط جایگاه برش Taq1 ژن کلسیتونین و پلی مورفیسم (Alu1 (rs1801197 ژن کلسیتونین رسپتور با میزان تراکم استخوان در زنان بالای 45 سال در شهرستان شهرکرد
زمینه و هدف: پوکی استخوان، شایع ترین اختلال در متابولیسم مواد معدنی استخوان است. جایگاه برشی Taq1 در ژن کلسیتونین و پلی مورفیسم AluI در ژن گیرنده ی کلسیتونین به عنوان عوامل ژنتیکی می توانند در ارتباط با میزان تراکم استخوان باشند. هدف از این مطالعه تعیین ارتباط بین جایگاه برش Taq1 و پلی مورفیسم AluI با میزان تراکم استخوان بود. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی- تحلیلی، 200 خانم بالای 45 سال مراجع...
متن کاملافزایش تولید آنتی بیوتیک کلاولانیکاسید با ایجاد گونه های استرپتومایسس کلاولی جروس تراریخت واجد ژن clar
مقدمه : کلاولانیکاسید از جمله آنتی بیوتیک های مهار کننده ی β لاکتاماز بوده که توسط استرپتومایسس کلاولی جروس تولید میشود. کلاولانیکاسید در ترکیب با سایر آنتی بیوتیک های قوی و حساس به β لاکتاماز مورد استفاده بالینی قرار میگیرد. ژن calr از جمله ژن هایی بوده که نقش مهمی در تنظیم تولید کلاولانیکاسید ایفا نموده و به منظور بیان ژن های اواخر مسیر بیوسنتز کلاولانیکاسید مورد نیاز است. مواد و رو...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 6 شماره 3
صفحات 207- 216
تاریخ انتشار 2005-05
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023